熒光顯微鏡(Fluorescence microscope) : 熒光顯微鏡是以紫外線為光源, 用以照射被檢物體, 使之發(fā)出熒光, 然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。
熒光顯微鏡用于研究細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的吸收、運(yùn)輸、化學(xué)物質(zhì)的分布及定位等。 細(xì)胞中有些物質(zhì),如葉綠素等,受紫外線照射后可發(fā)熒光;另有一些物質(zhì)本身雖不能發(fā)熒光,但如果用熒光染料或熒光抗體染色后,經(jīng)紫外線照射亦可發(fā)熒光,熒光顯微鏡就是對(duì)這類(lèi)物質(zhì)進(jìn)行定性和定量研究的工具之一。
熒光顯微鏡是一種常用的顯微鏡,能夠觀察細(xì)胞、組織和分子水平的結(jié)構(gòu)和功能。以下是熒光顯微鏡的使用方法及注意事項(xiàng):
使用方法:
1、準(zhǔn)備樣本
根據(jù)需要選擇合適的熒光染料,并對(duì)待觀察物進(jìn)行標(biāo)記。樣品必須保持濕潤(rùn)且盡可能薄。
2、調(diào)節(jié)顯微鏡:
將熒光濾光片放在光源上,并選擇波長(zhǎng)相應(yīng)的熒光染料。調(diào)整目鏡和物鏡的焦距,以獲得清晰的圖像。
3、觀察樣品:
將樣品置于載玻片上,利用移動(dòng)放大倍數(shù)和聚焦輪控制視野。觀察時(shí)要避免過(guò)度曝光,以防止熒光淬滅。
4、拍攝圖像:
可以使用數(shù)碼相機(jī)或者CCD攝像機(jī)記錄熒光信號(hào)。
注意事項(xiàng):
1、熒光染料的選取要與觀察目標(biāo)相匹配,否則會(huì)影響成像效果。
2、樣品處理需謹(jǐn)慎,避免讓熒光染料與其他化學(xué)物質(zhì)反應(yīng),嚴(yán)禁使用有機(jī)溶劑。
3、必須保持顯微鏡和樣品的清潔,避免灰塵、指紋等雜質(zhì)干擾成像。
4、在觀察過(guò)程中要避免熒光染料淬滅,因此要控制曝光時(shí)間和光強(qiáng)。同時(shí),長(zhǎng)時(shí)間使用也會(huì)造成熒光淬滅。
5、操作時(shí)需小心謹(jǐn)慎,避免損壞昂貴的熒光顯微鏡設(shè)備。
總之,熒光顯微鏡是一種非常有用的生物學(xué)工具,但需要仔細(xì)操作并注意以上事項(xiàng),才能獲得準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)和圖像。